TC20細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用革新性的血細(xì)胞計(jì)數(shù)室設(shè)計(jì)，能使細(xì)胞呈單層、靜止、均一的狀態(tài)平鋪于檢測(cè)室中，確保了多個(gè)視野的光學(xué)聚焦的性，消除了信號(hào)重疊和漂移現(xiàn)象。此外，該技術(shù)還為那些檢測(cè)流動(dòng)中的細(xì)胞某一單一視野、通過移動(dòng)樣品來(lái)聚焦成像的儀器提供了解決方案。
 

　　TC20細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的原理：

　　電阻抗檢測(cè)原理血細(xì)胞是相對(duì)不良導(dǎo)體,當(dāng)血細(xì)胞懸浮電解質(zhì)中,將小孔管插入細(xì)胞懸液,使其管內(nèi)充滿稀釋液,當(dāng)一個(gè)細(xì)胞通過小孔時(shí),瞬間引起電壓變化出現(xiàn)一個(gè)脈沖信號(hào),細(xì)胞體積越大,引起脈沖越大,產(chǎn)生脈沖振幅越高。

　　流式細(xì)胞術(shù)加光學(xué)檢測(cè)原理利用流式細(xì)胞術(shù)使單個(gè)細(xì)胞隨著流體動(dòng)力聚集的鞘流液在通過激光照射的檢測(cè)區(qū)時(shí),使光束發(fā)生折射、衍射和散射,散射光光檢測(cè)器接受后產(chǎn)生脈沖,脈沖大小與被照細(xì)胞的大小成正比,脈沖的數(shù)量代表了被照細(xì)胞的數(shù)量。
 

　　TC20細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么操作：

　　1、將計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上。

　　2、輕輕吹打細(xì)胞懸液,使細(xì)胞均勻分布;吸出少許細(xì)胞懸液滴在細(xì)胞入口,使細(xì)胞懸液充滿蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間,靜置1-2min,使細(xì)胞沉降;注意蓋玻片下不要有氣泡,也避免細(xì)胞懸液進(jìn)入旁邊的槽中。

　　3、在顯微鏡下對(duì)A/B/C/D四個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),壓在大格四周邊線上的細(xì)胞只計(jì)數(shù)壓在2條邊線上的細(xì)胞(如右側(cè)和下方);若鏡下有2個(gè)細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),則應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算;若細(xì)胞團(tuán)數(shù)量較多,占細(xì)胞總量的10%左右,則說(shuō)明細(xì)胞分散不好會(huì)導(dǎo)致計(jì)算不準(zhǔn)確,需要重新制備細(xì)胞懸液。

　　4、按公式計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量:細(xì)胞數(shù)/mL=四個(gè)大格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)×104/4?(每一個(gè)大格的體積為長(zhǎng)1mm×寬1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此計(jì)算時(shí)需×104)。
 

　　使用TC20細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的注意事項(xiàng)：

　　1、務(wù)必使分散成單個(gè)細(xì)胞,取樣計(jì)數(shù)前,充分混勻細(xì)胞懸液。

　　2、顯微鏡下計(jì)數(shù)時(shí),遇到2個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算。如果細(xì)胞團(tuán)>10%,說(shuō)明細(xì)胞分散不充分。

　　3、如果計(jì)數(shù)時(shí)細(xì)胞密度較大,數(shù)起來(lái)較麻煩也不容易計(jì)準(zhǔn),所以如果感覺細(xì)胞數(shù)量較多時(shí),可以從細(xì)胞懸液中吸取10至100u1,用少量PBS稀釋后再作計(jì)數(shù)。

　　4、注意蓋玻片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。

　　5、蓋玻片要盡量擦干凈,特別是不能帶有纖維,否則會(huì)造成體積不準(zhǔn)。另外四個(gè)大格中平均每個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)宜在50-150左右,這樣總數(shù)會(huì)比較準(zhǔn)確。